實驗室人的噩夢,您經歷過幾個?氨基酸衍生試劑盒的操作全流程解析來了!
實驗室人的噩夢,你經歷過幾個?
還記得那些年,我們為了測個氨基酸,不僅要忍受衍生試劑現配現用的焦躁,還要在精確的秒表倒計時里上演“手速大比拼"?
試劑降解了?重來!
峰形怪異?重來!
對于每一個在液相色譜前“求神拜佛"的檢測人來說,氨基酸衍生簡直就是一場對耐心、手速和運氣的考驗。
但在這個高速發展的新時代,索萊寶標準品要給這場“噩夢"畫上句號!作為你們實驗的“后勤保障部",今天就帶大家深扒一下,如何使用索萊寶新出的這款貨號:SDK1010 氨基酸衍生化試劑盒(OPA法),把這場讓人抓狂的實驗,變成一套行云流水的“傻瓜式"操作。
為什么大家都愛“OPA法"?
在《中國藥典》收錄的眾多衍生方法中,OPA(鄰苯二甲醛)法之所以能脫穎而出,成為實驗室的“流量擔當",是因為它有兩個絕殺技:
√ 速度極快:OPA與氨基酸在室溫下僅需數分鐘甚至數十秒即可完成反應。
√ 靈敏度高:衍生產物具有強紫外吸收(338 nm)或熒光特性,特別適合痕量分析。
那就廢話不多說,開始展示。

首先確認試劑盒看包裝有無破損、是否完好,然后打開試劑盒按照說明書嚴格操作。

01 實驗前準備工作
Pre-experimental preparations
1.配置流動相A

2. 配置流動相B

3. 將配置好的流動相A和B抽濾后轉移置流動相瓶中,超聲脫氣

注:配置好的流動相最好不要隔天(現用現配)。
4. 標準溶液的配制(標準品需用戶自備):按照說明書自行配置即可
5. 衍生試劑的配置(25T):可直接放入我們送的棕色無標簽空瓶中

注:避光待用即為衍生試劑(現用現配)。
02測定步驟
Determination steps
1. 打開電腦盒儀器各模塊按照說明書上的“二、測定步驟的1和2"進行設定儀器
2. 衍生步驟
自動衍生(展示的是安捷倫HPLC儀器的操作):

手動衍生

注:衍生后的產物不穩定,易發生降解,需要及時檢測
3. 實驗需要同時做空白對照:即用等量0.1M HCl(溶解標準品的溶劑)重復2中衍生步驟后進液相檢測,以排除空白干擾。
03 結果展示
Results presentation


溫馨提示
1. 衍生試劑盒不是提取試劑盒,其主要是為了讓氨基酸能夠被儀器檢測到,對提取出來的氨基酸進行的一系列操作~
2. 做實驗前需知:高效液相色譜儀(配備熒光(FLD)檢測器)、配備C18色譜柱(4.6×250 mm,耐水性≥90%)、抽濾裝置、可調式移液槍、注射器、0.22 μm有機系濾膜、色譜級甲醇、乙醇、乙腈等。
3. 該盒子不提供標準品,需要的標準品需自行購買; 如需訂制產品,請與我們聯系。
4. 由于液相儀器和色譜柱型號的不同,可以根據實際情況調整儀器設置條件。
5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
6. 該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
從“手動擋"的狼狽,到“自動擋"的從容,你差的只是一個好用的衍生化試劑盒。如果還有關于標準品選擇或使用流程的疑問,記得隨時滴滴你的標準品部門搭檔!
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注:除此之外您想了解更多信息,聯系我哦~
